Кометната анализа (Електрофореза со гел за единечни клетки, SCGE) е чувствителна и брза техника која првенствено се користи за откривање на оштетување на ДНК и поправка во поединечни клетки. Името „Assay на кометата“ доаѓа од карактеристичната форма на комета која се појавува во резултатите: јадрото на клетката ја формира „главата“, додека оштетените фрагменти на ДНК мигрираат, создавајќи „опашка“ слична на комета.
Принцип
Принципот на анализата на кометата се заснова на миграција на фрагменти на ДНК во електрично поле. Неоштетената ДНК останува во клеточното јадро, додека оштетената или фрагментирана ДНК мигрира кон анодата, формирајќи ја „опашката“ на кометата. Должината и интензитетот на опашката се директно пропорционални со степенот на оштетување на ДНК.
Постапка
- Подготовка на клетки: Клетките што треба да се тестираат се мешаат со агароза со ниска точка на топење и се шират на слајдови со микроскоп за да формираат униформа слој.
- Лиза на клетките: слајдовите се потопуваат во раствор за лиза за да се отстранат клеточната мембрана и нуклеарната мембрана, изложувајќи ја ДНК.
- Електрофореза: слајдовите се ставаат во комора за електрофореза под алкални или неутрални услови. Оштетените фрагменти на ДНК мигрираат кон позитивната електрода под влијание на електричното поле.
- Боење: По електрофорезата, слајдовите се обоени со флуоресцентна боја (на пр., етидиум бромид) за да се визуелизира ДНК.
- Микроскопска анализа: Со помош на флуоресцентен микроскоп или специјализиран софтвер, се анализираат формите на кометата и се мерат параметрите како должината и интензитетот на опашката.
Слика од biorender
Анализа на податоци
Резултатите од анализата на кометата се оценуваат врз основа на неколку клучни параметри:
- Должина на опашката: Го претставува растојанието низ кое мигрира ДНК, што укажува на степенот на оштетување на ДНК.
- Содржина на ДНК на опашката: Процентот на ДНК што мигрира во опашката, често се користи како квантитативна мерка за оштетување на ДНК.
- Момент на маслиново опашка (OTM): Ги комбинира должината на опашката и содржината на ДНК на опашката за да обезбеди посеопфатна мерка за оштетување на ДНК.
Апликации
- Студии за генотоксичност: Анализата на кометата е широко користена за проценка на ефектите на хемикалиите, лековите и зрачењето врз клеточната ДНК, што го прави клучна алатка за тестирање на генотоксичност.
- Токсикологија на животната средина: Помага во анализата на влијанието на загадувачите на животната средина врз ДНК на организмите, обезбедувајќи увид во безбедноста на екосистемот.
- Медицински и клинички истражувања: Анализата на кометата се користи во проучувањето на механизмите за поправка на ДНК, ракот и другите болести поврзани со ДНК. Исто така, го проценува влијанието на терапии за рак како радиотерапија и хемотерапија врз ДНК.
- Науки за храна и земјоделство: Се користи за проценка на безбедноста на пестицидите, прехранбените адитиви и други супстанции и за проучување на нивните токсични ефекти кај животинските модели.
Предности
- Висока чувствителност: Способен да открие ниски нивоа на оштетување на ДНК.
- Едноставна операција: Техниката е јасна, што ја прави погодна за скрининг со висока пропусност.
- Широка апликација: Може да се примени на различни типови клетки, вклучително животински и растителни клетки.
- Предизвици за квантификација: Додека обезбедува квалитативни податоци за оштетувањето на ДНК, квантитативната анализа во голема мера се потпира на софтвер и техники за анализа на слики.
- Експериментални услови: Резултатите може да бидат под влијание на фактори како што се времето на електрофореза и pH вредноста, што бара внимателна контрола на експерименталните услови.
Ограничувања
Comet Assay е непроценлива алатка во биомедицинските истражувања, науката за животната средина и развојот на лекови поради неговата флексибилност и висока чувствителност во откривање на оштетување и поправка на ДНК. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)нуди хоризонтална електрофореза комора за анализа на комета. Добредојдовте да контактирате со нас за да разговараме заАнализа на кометапротокол.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) е специјализирана за производство на инструменти за електрофореза повеќе од 50 години со нашиот сопствен професионален технички тим и центар за истражување и развој. Имаме сигурна и комплетна производна линија од дизајн до инспекција и магацин, како и маркетинг поддршка. Нашите главни производи се ќелија за електрофореза (резервоар/комора), напојување со електрофореза, сино LED трансилуминатор, УВ трансилуминатор, гел слика и систем за анализа итн.
Доколку имате некаков план за купување на нашите производи, не двоумете се да не контактирате. Можете да ни испратите порака на е-пошта[заштитена е-пошта]или[заштитена е-пошта], или ве молиме јавете ни се на +86 15810650221 или додадете Whatsapp +86 15810650221, или Wechat: 15810650221.
Скенирајте го QR-кодот за да го додадете на Whatsapp или WeChat.
Време на објавување: 20-сеп-2024 година