Вовед
Електрофорезата со гел е фундаментална техника во молекуларната биологија, широко користена за одвојување на протеини, нуклеински киселини и други макромолекули. Правилната контрола на волуменот на примерокот, напонот и времето на електрофореза е од клучно значење за постигнување точни и репродуктивни резултати.Нашиот лабораториски колега нудинајдобри практики за управување со овие параметри за време на SDS-PAGE гел електрофореза.
Пекинг Liuyi биотехнологија гел електрофореза производи
Обем на примерок: Обезбедување на конзистентност
Кога вршите електрофореза SDS-PAGE, волуменот на примерокот е клучен фактор што може значително да влијае на резолуцијата на вашите резултати. Генерално се препорачува да се вчитаат 10 µL вкупен протеин по бунар. За да се обезбеди конзистентност и да се спречи дифузија на примерокот помеѓу соседните бунари, важно е да се вчита еднаков волумен од 1x тампон за полнење во кој било празен бунар. Оваа мерка на претпазливост помага да се спречи ширењето на примероците во соседните ленти, што може да се случи ако бунарот се остави празен.
Пред да ги ставите вашите примероци, секогаш започнувајте со додавање маркер за молекуларна тежина на еден бунар. Ова овозможува лесна идентификација на големини на протеини по електрофореза.
Контрола на напон: Балансирање на брзина и резолуција
Напонот применет за време на електрофорезата директно влијае и на брзината со која примероците мигрираат низ гелот и на резолуцијата на одвојувањето. За SDS-PAGE, препорачливо е да се започне со низок напон од околу 80V. Овој првичен низок напон им овозможува на примероците да мигрираат бавно и рамномерно, концентрирајќи ги во остра лента додека влегуваат во гелот за одвојување.
Откако примероците целосно ќе влезат во гелот за одвојување, напонот може да се зголеми на 120V. Овој повисок напон ја забрзува миграцијата, осигурувајќи дека протеините се ефикасно одвоени според нивната молекуларна тежина. Неопходно е да се следи напредокот на предниот дел на бромофенол сината боја, што укажува на завршување на електрофорезата. За гелови со концентрација од 10-12%, вообичаено се доволни 80-90 минути; сепак, за 15% гелови, можеби ќе треба малку да го продолжите времето на работа.
Управување со времето: Знаејќи кога да престанете
Времето е уште еден критичен фактор во гел електрофорезата. Работењето на гелот предолго или премногу краток период може да доведе до неоптимално одвојување. Миграцијата на бромофенол сината боја е корисен показател: кога ќе стигне до дното на гелот, обично е време да се запре трчањето. За стандардни гелови, како што е 10-12%, времетраењето на електрофорезата од околу 80-90 минути е типично соодветно. За гелови со поголем процент, како 15%, времето на работа треба да се продолжи за да се обезбеди целосно раздвојување на протеините.
Управување со бафер: Повторна употреба и подготовка на бафери
Пуферот за електрофореза може да се користи повторно 1-2 пати, во зависност од специфичните услови на вашата лабораторија. Сепак, за оптимални резултати, се препорачува да се подготви свеж 10x пуфер и да се разреди непосредно пред употреба. Ова осигурува дека тампонот ја одржува својата ефикасност, што доведува до посигурни резултати од електрофореза.
Пекинг Liuyi биотехнологија гел електрофореза производи
Со внимателно контролирање на волуменот на примерокот, напонот и времето на електрофореза, може значително да ја подобрите точноста и репродуктивноста на резултатите од електрофорезата со гел. Спроведувањето на овие најдобри практики во вашата лабораториска работа ќе ви помогне да постигнете појасни и поизразени опсези, што ќе доведе до подобри податоци за низводно анализа.
Ако имате повеќе добри методи за оптимизирање на експериментот за електрофореза со гел, добредојде да разговарате со нас!
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) е специјализирана за производство на инструменти за електрофореза повеќе од 50 години со нашиот сопствен професионален технички тим и центар за истражување и развој. Имаме сигурна и комплетна производна линија од дизајн до инспекција и магацин, како и маркетинг поддршка. Нашите главни производи се ќелија за електрофореза (резервоар/комора), напојување со електрофореза, сино LED трансилуминатор, УВ трансилуминатор, гел слика и систем за анализа итн.
Доколку имате некаков план за купување на нашите производи, не двоумете се да не контактирате. Можете да ни испратите порака на е-пошта[заштитена е-пошта]или[заштитена е-пошта], или ве молиме јавете ни се на +86 15810650221 или додадете Whatsapp +86 15810650221, или Wechat: 15810650221.
Скенирајте го QR-кодот за да го додадете на Whatsapp или WeChat.
Време на објавување: 20.08.2024