Принцип
Електрофорезата на филм со целулоза ацетат е метод на електрофореза користејќи филм од целулоза ацетат како поддршка.Феноменот во кој наелектризираните честички се движат кон спротивната електрода под дејство на електричното поле се нарекува електрофореза.Бидејќи секој протеин има специфична изоелектрична точка, ако протеинот се стави во раствор со pH пониска од неговата изоелектрична точка, протеинот ќе биде позитивно наелектризиран и ќе се движи кон негативната електрода.Напротив, се движи кон позитивниот пол.Бидејќи брзината на протеинските молекули кои се движат во електричното поле е поврзана со нивниот полнеж, обликот и големината на молекулите, различните протеини може да се одвојат со електрофореза.Серумот содржи различни протеини, од кои сите имаат изоелектрични точки на pH 7,5 или помалку.Кога серумот се става во пуфер со pH 8,6 за да се изврши електрофореза, сите серумски протеини се негативно наелектризирани и ќе се движат кон позитивната страна во електричното поле.Бидејќи различните серумски протеини имаат различни полнежи на иста pH вредност, молекуларните честички се различни по големина, а со тоа и брзината на миграција е различна и тие се одвојуваат со електрофореза.Изоелектричните точки и молекуларните тежини на серумските протеини се прикажани во табелата подолу:
| Протеини | Изоелектрични точки (PI) | Молекуларна тежина |
| Албумин | 4.88 | 69 000 |
| α1-глулин | 5.00 часот | 200 000 |
| α2-глулин | 5.06 | 300 000 |
| β-глулин | 5.12 | 9 000-150 000 |
| γ-глулин | 6,85~7,50 | 156 000-300 000 |
Експериментот е да се одделат различни протеини во крвниот серум со мембрана на целулоза ацетат (скрат. CAM) како медиум за поддршка.CAM е еден вид пенест лосeфилм со добра униформа, а дебелината е 0,1mm-1,5mm, што има одредена апсорпција на вода.
Материјали, инструменти и реагенси за CAM електрофореза
Примероци:здрав човечки крвен серум
Инструмент:напојување DYY-6C, резервоар за електрофореза DYCP-38C, супериорно полнење на примерокот WD-9404
Реагенсите
1) целулоза ацетатна мембрана 7X9cm
2) PH 8,6 барбитол пуфер раствор (јонска јачина 0,05-0,09, време е 0,06 ден.): земете 1,84 g Диетил барбитурна киселина, а потоа земете 1,03 g Диетил натриум пентобарбитал, додадете малку дестилирана вода за да се загрее за да се раствори и направете до 1000 ml;
3) Дамка: Ponceau S 0,2 g, трихлороцетик 3 g, додадете 100 ml дестилирана вода;
4) TBS/T или PBS/T: 45ml 95% етанол, 5ml глацијална оцетна киселина, додадете 50ml дестилирана вода;
5) Раствор за чистење: 70 ml безводен етанол, 30 ml глацијална оцетна киселина.
Експеримент методd
1) Подгответе ја мембраната: Потопете ја мембраната во пуферот на барбитол 30 мин-8 часа и извадете ја, отстранете го дополнителниот раствор со абсорбента хартија.
2) Вчитување примероци: Разликувајте ја грубата и мазната страна на мембраната и означете линија на растојание од 1,5 cm до горниот крај на грубата страна.Вчитајте примероци со супериорна алатка за вчитување примероци на грубата страна.Забелешка: Примероците треба да се стават на грубата страна на мембраната.Откако серумските примероци се целосно навлезени во мембраната, превртете ја мембраната, ставете ја грубата страна (со примероци) свртена надолу кон резервоарот, а крајот со примероците се става во негативна електрода.
3) Електрофореза: Вклучете го напојувањето, 0.4～Мембрана 0,6m A/cm, времетраењето на работата е 30-45 мин.Откако ќе извршите електрофореза, исклучете го напојувањето.
4) Извалкајте и исчистете: извадете ја мембраната од резервоарот и потопетеit во растворот за боја за 5 минути, а потоа чистете го во растворот за чистење одново и одново 3-4 пати додека бојата на позадината не стане јасна.Серумските протеини треба да бидат прикажани на лентите, и нормално има пет зони, од горниот крај до означената линија, Албумин, α1-глулин, α2-глулин, β-глулин, γ-глулин.
5) Конзервирање: ставете ја сувата електрофорезабендво раствор за чистење 10-15 минути, а потоа извадете го и залепете го на чиста чаша, откако ќе се исуши ќе стане проѕирна фолија.бенд.
ЕкспериментирајтеРезултат
Ефектот на раздвојување на примероците од серумот е добар и не постои феномен на опашка на лентата.Повторливоста на резултатите варира поради тест процедурите и методите на експериментаторот, а повторливоста е висока.
Заклучок
Брзиот систем за откривање на клиничка електрофореза (Резервоар за електрофорезаDYCP-38C,напојувањеDYY-6C и супериорно вчитување примерок WD-9404) произведени од нашатакомпанија Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdги исполнува експерименталните барања,ирезултатите се репродуктивни, едноставни и брзи, погодни занаставатаистражување.
Пекинг ЛиуиBiotechnology Co., Ltd е специјализирана за производство на производи за електрофореза за индустријата за животни науки, којаима повеќе од 50-годишна историја во Кина и компанијата може да обезбеди стабилни и висококвалитетни производи низ целиот свет.Низ годините на развој, тој е достоен за ваш избор!
Сега бараме партнери, добредојдени се и OEM резервоарот за електрофореза и дистрибутерите.
За повеќе информации за нас, ве молиме контактирајте не преку е-пошта[заштитена е-пошта]или[заштитена е-пошта].
Време на објавување: 14-11-2022 година