Електрофореза со полиакриламид гел
Електрофорезата со гел е фундаментална техника во лабораториите низ биолошките дисциплини, дозволувајќи раздвојување на макромолекули како што се ДНК, РНК и протеини.Различните средства за раздвојување и механизми овозможуваат подмножества од овие молекули да се одвојат поефикасно со искористување на нивните физички карактеристики.Конкретно за протеините, техниката на избор често е полиакриламид гел електрофореза (PAGE).
PAGE е техника која ги одвојува макромолекулите како што се протеините врз основа на нивната електрофоретска подвижност, односно способноста на аналитите да се движат кон електрода со спротивен полнеж.Во PAGE, тоа се одредува според полнежот, големината (молекуларната тежина) и обликот на молекулата.Аналитите се движат низ порите формирани во полиакриламид гел.За разлика од ДНК и РНК, протеините се различни во зависност од вградените амино киселини, што може да влијае на нивното функционирање.Низите на аминокиселините, исто така, може да формираат секундарни структури кои влијаат на нивната привидна големина и следствено на тоа како тие се способни да се движат низ порите.Затоа понекогаш може да биде пожелно да се денатурираат протеините пред електрофореза за да се линеаризираат доколку е потребна попрецизна проценка на големината.
СТРАНИЦА СДС
Натриум-додецил сулфат полиакриламид гел електрофореза е техника која се користи за одвојување на протеински молекули со маса од 5 до 250 kDa.Протеините се одвојуваат исклучиво врз основа на нивната молекуларна тежина.Натриум додекал сулфат, анјонски сурфактант, се додава во подготовката на гелови што ги маскира внатрешните полнежи на протеинските примероци и им дава сличен однос на полнежот и масата.Со едноставни зборови, ги денатурира протеините и им дава негативен полнеж.
Мајчин PAGE
Native PAGE е техника која користи неденатурирани гелови за сепарација на протеините.За разлика од SDS PAGE, во подготовката на гелови не се додава средство за денатурација.Како резултат на тоа, одвојувањето на протеините се одвива врз основа на полнењето и големината на протеините.Во оваа техника, конформацијата, преклопувањето и синџирите на аминокиселините на протеините се факторите од кои зависи раздвојувањето.Протеините не се оштетуваат во овој процес и можат да се обноват по завршувањето на сепарацијата.
Како функционира полиакриламид гел електрофореза (PAGE)?
Основниот принцип на PAGE е да се одделат аналитите со нивно пропуштање низ порите на полиакриламид гел со помош на електрична струја.За да се постигне ова, мешавината акриламид-бисакриламид се полимеризира (полиакриламид) со додавање на амониум персулфат (APS).Реакцијата, која е катализирана од тетраметилендиамин (TEMED), формира мрежа слична на структура со пори низ кои аналитите можат да се движат (слика 2).Колку е поголем процентот на вкупниот акриламид вклучен во гелот, толку е помала големината на порите, па оттука и помали протеините кои ќе можат да поминат низ.Односот на акриламид и бисакриламид исто така ќе влијае на големината на порите, но тоа често се одржува константно.Помалите димензии на порите исто така ја намалуваат брзината со која малите протеини се способни да се движат низ гелот, подобрувајќи ја нивната резолуција и спречувајќи ги брзо да истечат во тампонот кога ќе се примени струја.
Опрема за електрофореза со полиакриламид гел
Ќелија за електрофореза со гел (резервоар/комора)
Резервоарот за гел за електрофореза на полиакриламид гел (PAGE) е различен од резервоарот за гел агароза.Резервоарот за гел агароза е хоризонтален, додека резервоарот PAGE е вертикален.Со ќелија за вертикална електрофореза (резервоар/комора), тенок гел (нормално 1,0 mm или 1,5 mm) се истура помеѓу две стаклени плочи и се монтира така што дното на гелот е потопен во тампон во една комора, а горниот дел е потопен во пуфер. во друга комора.Кога се применува струја, мала количина на тампон мигрира низ гелот од горната комора до долната комора.Со силни стеги кои гарантираат дека склопот ќе остане во исправена положба, опремата го олеснува брзото пуштање на гелот со рамномерно ладење што резултира со различни ленти.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) произведува низа големини на ќелии за електрофореза на полиакриламид гел (тенкови/комори).Моделите DYCZ-20C и DYCZ-20G се ќелии за вертикална електрофореза (тенкови/комори) за анализа на секвенционирање на ДНК.Некои од ќелиите за вертикална електрофореза (тенкови/комори) се компатибилни со системот за бришење, како што се моделите DYCZ-24DN, DYCZ-25D и DYCZ-25E се компатибилни со Western Blotting системот модел DYCZ-40D, DYCZ-40G и DYCZ-40F, кои се користат за пренесување на протеинската молекула од гел во мембрана.По електрофорезата SDS-PAGE, Western Blotting е техника за откривање на специфичен протеин во протеинска мешавина.Можете да ги изберете овие системи за бришење според експерименталните барања.
Електрофореза напојување
За да обезбедите електрична енергија за водење на гелот, ќе ви треба напојување за електрофореза.Во Liuyi Biotechnology обезбедуваме низа напојувања за електрофореза за сите апликации.Моделот DYY-12 и DYY-12C со висок стабилен напон и струја може да ги исполни барањата за електрофореза за висок напон.Има функција на стој, тајминг, VH и чекор-по-чекор апликација.Тие се идеални за примена на електрофореза за секвенционирање на IEF и ДНК.За општа примена на електрофореза на протеини и ДНК, го имаме моделот DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 и така натаму, кои се исто така топли продажни напојувања со ќелии за електрофореза (тенкови/комори).Овие можат да се користат за апликации за електрофореза со среден и низок напон, како што се за училишна лабораторија, болничка лабораторија и така натаму.Повеќе модели за напојување, посетете ја нашата веб-страница.
Брендот Liuyi има повеќе од 50-годишна историја во Кина и компанијата може да обезбеди стабилни и висококвалитетни производи низ целиот свет.Низ долгогодишниот развој, тој е достоен за ваш избор!
За повеќе информации за нас, ве молиме контактирајте не преку е-пошта[заштитена е-пошта] or [заштитена е-пошта].
Референци за Што е полиакриламид гел електрофореза?
1. Карен Стјуард д-р Електрофореза со полиакриламид гел, како функционира, варијанти на техника и нејзини апликации
Време на објавување: мај-23-2022 година